细胞器及细胞组分的分级分离
离心方法是分离提取亚细胞结构和功能分子的重要手段。利用细胞内各种颗粒成分的大小、形状和密度不同,采用差速离心或密度梯度离心的方法将其分离。蛋白、核酸等细胞的功能分子存在于亚细胞结构的基质或细胞匀浆离心后形成的上清中,可利用层析技术或离心技术进一步分离纯化。电泳技术可对分离纯化得到的终产物进行初步的鉴定
蛋白质的分离与鉴定
蛋白质是细胞内的最主要成分,它们不仅参与形成细胞的各种结构,还几乎是细胞所用功能的执行者。因此,分离和鉴定各种目的蛋白,也是当今细胞生物学不可缺少的技术。
将蛋白质进行分级分离并最终进行纯化,常常需要综合运用多种分离手段才能够完成,包括盐析、有机溶剂沉淀、各种常规层析、高压液相层析(high performance liquid chromatography, HPLC)等。要根据目的蛋白质在组织或细胞中的含量,蛋白质分子量的大小,蛋白质的理化性质及检测方法来摸索、选择合适的途径。
核酸的分离纯化与鉴定