小RNA呢，包括了micro RNA/tRNA/piRNA等一系列的、片段比较短的RNA。
其中，micro RNA因为其基因数量众多，表达量变化丰富——研究热点
small RNA的结构：5’端有一个磷酸基团，3’端有一个羟基基团
目前用illumina Truseq small RNA建库试剂盒。
对组织中抽提到的总RNA进行small RNA建库。一般一个反应需要1微克的总RNA。
同时small RNA建库，一般是要求总RNA的RIN值大于等于8.0
一般情况下，人源组织所测到的small RNA会在22BP左右有一个主峰。这个主峰就是micro RNA，同时，30BP左右又会有一个副峰，这个峰，主要是piRNA。
接下来，就是把small RNA，比对到参考基因组上。
在参考基因组上比对好之后，就可以把这些序列和已知的small RNA数据库进行比对了。
比较有名的small RNA数据库是miRBase，这个数据库目前这个数据库已经收录了2000多条人源的micro RNA基因。
在对人源样本的测序过程当中，大家最关心的主要是micro RNA和piRNA，实际上还会测到rRNA的碎片和tRNA的序列。因为rRNA和tRNA在人的基因组中是十分保守的，所以一般不是我们关注的重点。
以上，我们说的都是组织中的small RNA的测序和分析。