是将蛋白质电泳、印迹和免疫测定结合在一起的检测方法，具有很高的灵敏度，可从总蛋白中检测出50ng的特异性表达蛋白
<aside> 🍁 原理
经过PAGE分离（根据分子量大小）的蛋白质样品【SDS：阴离子去污剂，疏水端覆盖在蛋白表面 1.4g SD /per，电泳驱动力】，转移到固相载体上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色/ 放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。
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[ ] 转膜（ nitrocellulose or polyvinylidene difluoride (PVDF) ）
凝胶若是没在预冷的转膜buffer中漫泡，就会在转膜过程中出现凝胶皱缩，导致出现转移条带变形。PVDP膜具有疏水性，需用甲醉浸泡
[ ] 思考：当有多种蛋白用PAGE电泳无法分离时如何处理？
双向电泳（2D gel electrophoresis）：等电聚焦电泳与PAGE相结合，可以将分子量相同而等电点不同的蛋白质以及等电点相同而分子量不同的蛋白质分开。
是一种检测 蛋白质后转录修饰 post translational modifications (PTM) 的技术，其检测目标是蛋白质上特定的修饰基团或部位，如脂肪酸链、糖基、磷酸化的氨基酸等。
在Eastern Blotting的实验中，通常要先用等电聚焦电泳将蛋白质分离，然后转到膜上，再用特异的探针去检测。
<aside> 🍁 等电聚焦电泳（Isoelectric focusing (IEF), also known as electrofocusing）
利用一种特殊的缓冲液（两性电解质）在凝胶（常用聚丙烯酰胺凝胶）内制造一个pH梯度，电泳时每种蛋白质就将迁移到等于其等电点（pI）的pH处（此时此蛋白质不再带有净的正或负电荷），形成一个很窄的区带
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