<aside> ⭕ 限制性核酸内切酶（Restriction endonuclease)

是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列（通常是回文序列），并由此处或附近区域切割DNA双链的核酸内切酶。

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发现：细菌的限制- 修饰作用

• 细胞的限制-修饰作用
• 细菌的限制-修饰系统
• 限制性内切酶的发现

揭秘细菌的限制_修饰系统_诺贝尔奖得主阿贝尔自传.pdf

• [ ] 寄主的限制与修饰现象

  • 限制(restriction)：指一定类型的细菌可以通过限制酶的作用，破坏入侵的噬菌体DNA，导致噬菌体的寄主幅度受到限制。

    限制作用：实际就是限制性内切酶降解外源 DNA，维护宿主遗传稳定的保护机制。

  • 修饰(modification)：指寄主本身的DNA，由于在合成后通过甲基化酶的作用得以甲基化，使DNA得以修饰，从而免遭自身限制性酶的破坏。

    修饰作用：宿主细胞通过甲基化作用达到识别自身遗传物质和外来遗传物质的目的

    • Dam甲基化酶
    • Dcm甲基化酶

命名原则

• 1973年H.O.Smith和D.Nathans首次提出命名原则，1980年Roberts在此基础上进行了系统分类。
• 命名原则

分类

据限制性核酸内切酶的识别切割特性、催化条件及是否具有修饰酶活性，可分为

• Ⅰ型限制性内切酶

Ⅱ类限制性内切酶

• Ⅲ型限制性内切酶

限制性核酸内切酶的类型及主要特性

作用

1. 在特异位点上切割DNA，产生特异的限制性酶片段，使得DNA片段的纯化成为可能
2. 用限制酶切出的相同粘性末端，以便重组。
3. 改建质粒
4. 建立DNA分子的限制酶图谱【切割位点可为获得DNA物理图谱的特殊标记】
5. 构建基因文库