Transmission electron microscope (TEM):examination of the internal structure of cells.

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把经加速和聚集的电子束投射到非常薄的样品上,电子与样品中的原子碰撞而改变方向,从而产生立体角散射。散射角的大小与样品的密度、厚度相关,【电子穿透数目<=>样品电子密度】因此可以形成明暗不同的影像,影像将在放大、聚焦后在成像器件(如荧光屏、胶片、以及感光耦合组件)上显示出来。散射的电子不参加成像,故标本中密度大的部分成像后形成电子流蜇减少的暗区,相反,标本密度小的部位散射电子少而形成明区。

SEM与TEM的区别

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电子显微镜的样品室通过抽真空处理降至极低压力。置于这种环境下的活细胞无法有效保全结构,因为细胞构成中的大部分水分会快速蒸发。

生物样本的制备方法有很多种。样品材料被**(固定)**保存,防止生物样品在死亡后和在脱水过程中产生结构改变,同时可以使用环境扫描电镜(SEM)或者将水冷冻。

透射电子显微镜借助金属投影、冰冻断裂及冰冻蚀刻技术可获取三维图像。

大型透射电镜

大型透射电镜(conventional TEM)一般采用80-300kV电子束加速电压,不同型号对应不同的电子束加速电压,其分辨率与电子束加速电压相关,可达0.2-0.1nm,高端机型可实现原子级分辨。

低压透射电镜

低压小型透射电镜(Low-Voltage electron microscope, LVEM)采用的电子束加速电压(5kV)远低于大型透射电镜。较低的加速电压会增强电子束与样品的作用强度,从而使图像衬度、对比度提升,尤其适合高分子、生物等样品;同时,低压透射电镜对样品的损坏较小。

分辨率较大型电镜低,1-2nm。由于采用低电压,可以在一台设备上整合透射电镜、扫描电镜与扫描透射电镜

冷冻电镜

冷冻电镜(Cryo-microscopy)通常是在普通透射电镜上加装样品冷冻设备,将样品冷却到液氮温度(77K),用于观测蛋白、生物切片等对温度敏感的样品。通过对样品的冷冻,可以降低电子束对样品的损伤,减小样品的形变,从而得到更加真实的样品形貌。