一、原生质体的制备过程

收集对数生长期细胞——高渗缓冲液——水解酶——作用一段时间——除去细胞壁碎片——原生质体

<aside> 🎯 细胞壁的主要成分

细菌：肽聚糖(N-乙酰萄糖胺，N-乙酰胞壁酸) 酵母：葡聚糖，甘露聚糖，蛋白质 真菌: 多糖（几丁质和葡聚糖） 动物细胞无细胞壁，较容易被破碎

• 各种微生物细胞壁的结构与组成 </aside>

• 制备原生质体的酶

二、固定化原生质体的特点

1、稳定性较好，利于连续化生产

2、利于胞内物质的分泌

3、利于氧气和营养物质的传递吸收，提高产酶率

4、易于分离纯化

三、固定化原生质体发酵产酶的工艺条件及控制：

1、渗透压的控制：发酵液中需加 渗透压稳定剂；层析/膜分离……分离产物 2、防止细胞壁再生：加入 青霉素……抑制细胞壁生长 3、固定化原生质体时，保证原生质体浓度（除去细胞壁- -影响细胞正常生长繁殖）