基因工程中使用的Ⅱ类限制性内切核酸酶不仅有内切核酸酶的活性,而且有甲基化酶的活性
我的答案:×
限制与修饰现象是宿主的一种保护体系,它是通过对外源DNA的修饰和对自身DNA的限制实现的
我的答案:×
能够产生防御病毒侵染的限制性内切核酸酶的细菌,其本身的基因组中没有被该核酸酶识别的序列。
我的答案:×
同尾酶的粘性末端相互结合后形成的新位点仍可以被原来的限制性内切酶所识别。
我的答案:×
在限制性内切酶两端添加保护碱基时,一般而言应该关注的是保护碱基的种类,而不是数目。
我的答案:×
如果限制性内切核酸酶的识别位点位于DNA分子的末端,那么接近末端的程度也影响切割,如HpaⅡ和MboI要求识别序列之前至少有一个碱基对存在才能切割。
我的答案:√
甲基化酶和DNA连接酶都需要引物。
正确答案:×
T4 DNA连接酶和E.coli连接酶作用时都需要ATP和NAD+作为辅助因子。
正确答案:×
Bal 31核酸酶是Ca2+依赖性的,在反应混合物中加入EDTA便可抑制它的活性。
正确答案:× EGTA抑制
E.coli中Dam甲基化酶可将回文序列5'-GATC-3'中腺苷酸的N6位甲基化。
正确答案:√
T4DNA连接酶和E. coli 连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接。
错误。E. coli 连接酶不能催化平末端连接。
T4DNA连接酶和E.'coli连接酶都能催化双链DNA和单链DNA的连接。
错误。都不能催化单链DNA的连接。
反转录酶能够以单链RNA或单链DNA为模板,在引物的引发下合成一条互补的DNA链。以RNA为模板合成的DNA是互补DNA(complementary DNA,cDNA)。若是以DNA模板合成DNA,dNTP的掺人速度很低(约5个核苷酸/秒),比T7DNA聚合酶的合成速度差不多低100倍。
正确。
以RNA为模板,,用反转录酶可同时产生单链和双链的cDNA,双链DNA是由自身引物引导合成。但这种自身引物引导的合成效率远低于外加寡核苷酸引物引导的合成。
正确。
λ外切核酸酶不能在双链DNA的gap和nick处切割DNA。,
正确。
当一个DNA结合蛋白同它识别的核苷酸序列结合以后,就保护了它们的磷酸二酯键免遭切割,其结果,电泳胶.上就有明显可见的空缺带(与对照相比),这就是DNA足迹法。
正确。
T4DNA连接酶和E. coli 连接酶作用时都需要ATP和NAD*作为辅助因子。
错误。前者需要ATP,后者需要NAD+.
多核苷酸激酶之所以能够用于DNA片段的标记,是因为它能够将单个的32p标记的单核苷酸加到每一DNA 链的5’端。
错误。人将ATP上的32p加到5'端。
在反转录过程中,使用AMV比使用M-MLV可得到较多的产物。
错误。使用M-MLV反转录酶比使用AMV反转录酶得到较多的产物。原因是AMV反转录酶的RNaseH的活性较M-MLV反转录酶高,所以在以mRNA为模板的反转录过程中,使用AMV反转录酶,模板被降解得快,所以得到的产物较少。