当将分泌蛋白的mRNA在无细胞体系中进行翻译时，如果不加糙面内质网( 微粒体)，获得的翻译产物比从细胞中分泌出来的蛋白质要长，但是在无细胞系统中添加RER小泡后，翻译的产物长度与从活细胞分泌的蛋白质相同。
因此推测信号序列在引导蛋自质进入内质网后被切除了，所以成熟的蛋白质的N嘴没有信号序列。通常将有信号序列的蛋白质称为前蛋白质/ 前肽。
在分泌蛋白进行体外翻译的无细胞系统中(含有RER小泡)加入蛋白水解酶，并不能使新生肽水解。但同时加入去垢剂，则能将蛋白质水解，提示新生肽链是边合成边运输的，因为去垢剂能够破坏内质网的膜，使合成的蛋白质暴露被蛋白水解酶降解。若无去垢剂，多肽在合成的同时就向内质网转运，所以不受蛋白水解酶的影响。
多聚核糖体是研究内质网帮助蛋白质运输的好材料。
不难想像，当一条mRNA上结合有若干个核糖体进行蛋白质翻译时，最先结合上的核糖体，其合成的多肽最长，最尾端的核糖体只是刚刚开始进行翻译。如果翻译的是分泌蛋白，最先结合上的核糖体合成的多肽，其N端可能没有了信号序列，因为在内质网中被切除了。
从骨髓瘤分离多聚核糖体，用去垢剂处理，使之与内质网膜分离后，继续在无细胞体系(不含RER小泡)中进行翻译。发现:短时间温育，即可得到成熟的分泌蛋白(无信号序列)；而长时间的温育，得到的产物N端有信号序列。这一结果说明由于mRNA中多聚核糖体合成蛋白质的不同步，位于mRNA3'端的核糖体合成的蛋白质在分离前不仅进入了内质网，而且在内质网的腔中被切除了信号序列。越靠近mRNA5'端的核糖体合成的蛋白质越短，所以在体外经较长时间的翻译得到的是含有信号序列的前蛋白质，因为没有了内质网，信号序列则不能被切除。
