一、固定化细胞

采用各种方法固定在水不溶性载体上，在一定的空间范围内进行生长、繁殖和新陈代谢的细胞。

二、固定化细胞的特点

提高产酶率；可以反复使用或连续使用较长时间；基因工程菌的质粒稳定，不易丢失；发酵稳定性好；缩短生产周期，提高设备利用率；产品容易分离纯化；适用于胞外酶等胞外产物的生产

• [ ] 优越性：

  (1)降低成本，省去酶的分离纯化工作; (2)既可作为单一酶，也可作为复合酶系完成部分代谢过程。

• [ ] 局限性：

  (1)细胞内多种酶的存在，会形成不需要的副产物。 (2)细胞膜、细胞壁和载体都存在着扩散限制作用。

三、工艺条件控制

1、固定化细胞的预培养，利于固定化细胞生长繁殖（预培养- -适合细胞生长—-→适合酶发酵培养——若生长阶段、产酶阶段没有不同要求- -直接采用适合酶发酵培养的工艺条件）

2、溶解氧的供给：载体影响（氧的溶解、传递受到一定的阻碍）——不能剧烈搅拌、加大通气量、改变固定化方法

3、温度的控制：固定化细胞对温度适应范围较广；连续培养时，培养液需预先调温（在连续发酵过程中，由于稀释率较高,反应器内温度变化较大。若只是在反应器内部进行温度调节控制，则在加入的培养液温度与发酵液温度相差较大时，难于达到要求）

4、培养基成分的控制：注意载体的稳定性、溶氧、培养基粘度—→保持固定化细胞的完整性

<aside> 🛖 海藻酸钙凝胶包埋法

1. 称取一定量的海藻酸钠，溶于水，配制成一定浓度的海藻酸钠溶液。
2. 经杀菌冷却后，与一定体积的酶液或细胞、原生质体悬浮液混合均匀
3. 用注射器或滴管将冷凝悬浮液滴到一定浓度的氯化钙溶液中，形成球状固定化细胞颗粒。
4. 注意：控制磷酸盐浓度；控制钙离子浓度，维持凝胶结构的稳定性；通过改变海藻酸钠的浓度可改变凝胶的孔径 </aside>

四、固定化细胞生长和产酶动力学

• （一）、固定化细胞生长动力学
• （二）、固定化细胞产酶动力学
• （三）、固定化细胞连续产酶动力学