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🪀 流式细胞术（Flow Cytometry, FCM）：Flow~流动的，Cyto~细胞，Metry~度量
- [ ] 特点：流动状态下，同时检测单个细胞的特性；快速；特异、灵敏；多参数同时分析
- [ ] 获得信息：微粒大小、微粒结构、表面抗原、胞内抗原、核内抗原、核酸、分泌蛋白……
- [ ] 应用：科研
（细胞凋亡；细胞周期/倍体；T细胞精细分型）、临床（白血病免疫分型；四色免洗淋巴亚群绝对计数；HLA-B27表型分析）、工业（细胞免疫治疗：药物开发；细胞技术开发）.....
- 样本制备：单细胞悬液（天然状态，机械研磨/消化）；5x$10^5$~ 1x$10^7$cells/ml，0.5~ 1ml，300 目筛网过滤（防止杂志污染机器）
- 阴性对照：
去除自发、非特异荧光干扰；设定实验检测条件
- 单阳性对照：
排除假阳性荧光干扰（荧光素的发射光谱重叠）
液流系统- - FLOW CELL（流动室）
光学系统-检测信号
电子系统-数据获取分析
FlowJo中文实用手册.pdf
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参数图
- 一维直方图（Histogram)- - -单参数分析
（显示一个通道的信息）
- 二维点图（Dot Plot)- - -双参数分析
（同时显示2个通道的信息）
- 等高线图（Contour Plot)- - -双参数分析
（同时显示2个通道的信息）
门“Gate”
- 门的形式：
区域(region,R) ，标记(Marker)， “十”字形(Quant)
- 定义“门”的方法(Gates)
- 门的3种组合：and; or; not (eg.Gate4=Gate1 or Gate2 or Gate3)
- Convert Marker To Gate(eg.M1=Gate 5)
- Convert Quads To Gates
数据统计
统计方式
- 百分比 (%)：一种细胞占样本中所有细胞的比例
- 荧光强度 (MFI)：Median=164.74所对应的值跟细胞表面受体个数正相关
叠加
- 峰图叠加 (Overlay)
- 点图叠加 (Overlay)
拟合