<aside> 🍁 cDNA library
利用某种生物的总mRNA合成cDNA,再将这些cDNA与载体连接,转入细菌细胞中进行保存和扩增,称cDNA文库
cDNA文库的大小:N=ln (1-p)/ln (1-1/n)
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cDNA文库的特点:不含内含子序列。可以在细菌中直接表达。几乎包含了所有编码蛋白质的基因。比DNA文库小的多,容易构建
<aside> 🍁 构建cDNA文库的一般步骤
总RNA(total RNA)提取
mRNA的分离纯化:真核mRNA3’端的Poly(A)尾可与oligo(dT)-纤维素柱吸附
cDNA的合成
cDNA与载体连接 </aside>
[ ] cDNA文库筛选技术:经典的克隆基因方法,但不易得到完整的基因全长,特别是基因的5’端