碱基、核苷、核苷酸和核酸在240~290nm的紫外波段有强烈的光吸收。
λmax=260nm
鉴定纯度
纯DNA的A260/A280应为1.8
纯RNA的A260/A280应为2.0
若溶液中含有杂蛋白或苯酚,则A260/A280比值明显降低
含量计算
1ABS值相当于:50 μg/mL双螺旋DNA
或:40 μg/mL单链DNA(或RNA)
或:20 μg/mL寡核苷酸
判断DNA是否变性
DNA的变性过程——摩尔吸光系数增大(增色效应)
DNA的复性过程——摩尔吸光系数减小(减色效应)