●大多数植物表达载体是质粒载体 ●最经典的植物表达载体是PB1121、PCAMBIA系列载体. ●植物表达载体与克隆质粒载体一样，可以克隆基因，同时还具备表达所克隆的基因的特性

Ti

农杆菌菌株将单链形式的T-DNA（T链）和毒力效应蛋白（Vir）转移到植物细胞中。转移后，T链可能与Vir和植物蛋白形成复合物，然后通过细胞质运输并进入细胞核。随后可以将T链随机整合到植物基因组（染色体上）并持续表达T链上编码的基因，这一过程称为稳定转化。T-DNA进入细胞后，即使未整合到宿主染色体，也能有T-DNA编码基因的瞬时表达，但转入基因的稳定表达（稳定转化）则需要T-DNA整合。

• 农杆菌Ti质粒介导的外源基因转化系
• 进行植物的定向转化一把有益基因转入植物

• 植物冠瘿瘤- - - 植物的一种癌症【根癌农杆菌】
• [ ] Ti质粒的基因位点及其功能区域
  • T- DNA区：T-DNA是农杆菌侵染植物细胞时，从Ti质粒上切割下来转移到植物细胞的一段DNA，故称之为转移DNA。该DNA片段上的基因与肿瘤的形成有关。
  • Vir区：该区段上的基因能激活T-DNA转移，使农杆菌表现出毒性，故称之为毒性区。T-DNA区 与Vir区在质粒DNA.上彼此相邻，合起来约占Ti质粒DNA的三分之一。
  • Con区：该区段上存在着与细菌间接合转移相关基因(tra) ，调控Ti质粒在农杆菌之间的转移。冠瘿碱能激活tra基因，诱导Ti质粒转移，因此称之为接合转移编码区。
  • Ori区：该区段基因调控Ti质粒的自我复制起始。

PBI 121

• RB (右边区域) : 2454-2478, 25bp gttacccaatatatcctgtaa

• LB (左边区域) : 8621-8646, 26bp tttacaccacaatatatcctgcca

• RB到LB间的DNA片段(2454-8648 )能够被转移到植物细胞中transfer-DNA, or T-DNA。因此称之为转移DNA或T-DNA

• CaMV 35S (35S)启动子：35S启动子是花椰菜花叶病病毒35S基因的启动子、35S启动子是组成型表达启动子

• 筛选标记基因NPT II：新霉素磷酸转移酶基因；该基因具有抗卡那霉素活性，能在含卡那霉素的抗生素培养基上生长

  其他的筛选标记基因：HPT:潮霉素、BAR:除草剂

• 报告基因GUS：GUS(uidA):葡萄糖苷酶基因、许多植物体内都无GUS基因存在、表达GUS转基因的细胞在GUS底物5溴-4-氯-3-吲哚-B-葡糖苷酸脂(X- Gluc)的存在下，显示蓝色、早期定性检测