<aside> 🍁 基因打靶：通过胚胎干细胞技术和同源重组技术，定向改变细胞或者动物遗传信息的分子生物学技术，，从而在生物活体内研究此基因的功能

分类：基因敲除（基因组中某个/某几个基因或者基因的顺式作用元件）；基因敲入；定点突变；缺失突变；染色体大片段删除。

为什么要做转基因动物：99%的人类编码基因可以在小鼠基因组中找到对应的同源序列，序列同源性高达80%以上。

• DNA 的损失修复系统 </aside>

胚胎干细胞打靶（同源重组技术）

• [ ] 特点：精确基因打靶；可实现loss of function；可实现复制基因编辑；技术要求高- - - - 方法费力且贵；可能导致胚胎致死表型
• [ ] ES细胞也称胚胎干细胞(embryonicstem cell, ES)：胚胎干细胞是早期胚胎(原肠胚期之前)或原始性腺中分离出来的一类细胞具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性

路线：

• 构建载体
• 质粒的提取及线性化
• ES细胞电转
• 药物筛选阳性ES细胞
• PCR、 Southern Blot分析
• ES细胞显微注射进囊胚
• 囊胚移植
• 嵌合体小鼠和WT杂交
• 杂合子互交→纯合子小鼠