该方法的优势是:

利用转录实现cDNA的扩增(每一轮转录可以扩大几千倍,两轮扩增达到几百万倍),避免使用PCR扩增带来的PCR偏差(不同扩增子间扩增效率差异随着循环达到几十次而达到指数级别)

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巧妙之处:

它不是用PCR来扩增核酸,而是用转录的方法来增加核酸的量。因为扩增那么多(倍)的核酸,如果用PCR,要用几十个循环,那么PCR不同的扩增子的扩增效率,即使一开始是很小的差异,也会在几十个循环中,被指数放大,变成一个很大的差异。

那么TargetAmp方法用转录的办法,而且统一都用T7这个统一的启动子,它转录的启始效率,大体上就保持了一致。

它的每一轮转录,都把核酸的量扩大几千倍。经过这样两轮的扩增,就把核酸的量扩大了几百万倍。这样,一方面它得到了高达几微克的核酸。足够用于建库,同时又避免了PCR过程,也就避免了PCR扩增偏差