（一）核糖体（核蛋白体）

核蛋白体的组成

s：沉降系数，与 相对分子质量 相关

原核生物翻译过程中核糖体结构模式 :

• 识别mRNA的位点：30S小亚基上，可容2个密码子
• 转肽酶活性：50S大亚基上，催化肽键的形成（原核23srRNA）
• P位点（肽酰基位点）：结合肽酰-tRNA的位点
• A位点（氨酰基位点）：结合氨酰-tRNA的位点； 更靠近3‘端
• E位点（排出位）：tRNA排出

（二）tRNA和氨基酰-tRNA合成酶

tRNA的接头（adaptor）作用 :

1. 3´-端上的氨基酸接受位点

2. 识别氨酰-tRNA合成酶的位点

   氨基酸与tRNA的特异结合：依靠氨酰tRNA合成酶的特异识别作用实现

3. 核糖体识别位点

4. 反密码子位点

   • 密码子与反密码子的特异结合：依靠碱基互补配对结合实现，也有赖于核糖体的构象正常而实现正常的装配功能
   • 密码子与反密码子的阅读方向均为5´→ 3´，两者反向平行配对。

基因间的校正突变:

校正突变可为二类:

一是发生在同一基因内，但不在该基因的同一部位，称为基因内突变校正 (Intragenic suppression);

二是发生在另一基因内，称为基因间突变校正 (Intergenic suppression)。

无意义和误义突变校正均可通过突变tRNA (或校正rRNA)介导。

氨基酸活化形成氨基酰-tRNA :

• An aminoacyl-tRNA synthetase attaches an amino acid to its tRNA
• 消耗ATP——>AMP
• 氨基酰-tRNA合成酶具有绝对专一性，对氨基酸、tRNA两种底物都能高度特异性地识别。
• 氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性。

氨基酰-tRNA的表示方法：

起始肽链合成的氨基酰-tRNA：

tRNA 3′末端

N-甲酰甲硫氨酸(fmet)的合成

（三）mRNA是蛋白质合成的模板

• 辨认起始密码子是翻译起始的必须步骤：确定阅读框架

  开放阅读框架（可译框）：

  以起始密码AUG开头，终止密码UAA，UAG，UGA结束，读框为三的倍数

• 按照不重叠三联体密码子翻译产生对应的氨基酸并形成肽键

• 当到达终止密码时，合成结束，肽链释放

• 通常终止密码不止一个，而是连续出现2-3个终止密码

• 对于某些病毒，如果中间有起始密码，则一条mRNA可产生2条或多条肽链

  

• 真核（单顺反子），原核（多顺反子）

  

1. 编码一个多肽的遗传单位称为顺反子（cistron）。
2. 原核细胞中数个结构基因常串联为一个转录单位，转录生成的mRNA可编码几种功能相关的蛋白质，为多顺反子（polycistron）。
3. 真核生物一个mRNA只编码一种蛋白质，为单顺反子（single cistron）。

• 起始密码的选择

  

  • 原核：SD序列——保守序列，富含嘌呤碱基，位于起始密码子上游- - 核糖体结合位点
  • 真核：5'端有甲基鸟苷酸构成的帽子；3'端有poly(A)尾巴，在其上游存在腺苷酸化的信号序列AAUAAA。真核生物mRNA无SD序列，在5'非翻译区和3'非翻译区存在调控序列，可结合各种调节因子以影响翻译的进行。在5'端起始密码子AUG附近常存在不同的茎环结构，它们或起正调节，或起负调节——在最适宜的序列（例如ACCAUGG）和二级结构环境中，起始密码子具有最高的起始频率。而在3'非翻译区除具有调节因子结合位点外，还有mRNA的定位信号序列。