<aside> ⭕ (亲）核蛋白（karyophilic protein）：

在细胞质内合成后，需要或能够进入细胞核内发挥功能的一类蛋白质，如各种组蛋白、DNA合成酶类、RNA转录和加工的酶等）。核蛋白一般都含有特殊的氨基酸信号序列（Nuclear localization signal，NLS），作为核孔运输的信号**【由含水核孔通道来鉴别，蛋白永性性部分，进入细胞核不被切除，可反复使用——有利于细胞分裂后核蛋白重新入核】**。核蛋白（含NLS）需要结合NLS受体蛋白（又称输入蛋白/载体），才能进入核内。

</aside>

<aside> ⭕ 核定位信号 （nuclear localization signal，NLS）：

1. NLS是存在于亲核蛋白内的一些短的氨基酸序列片段，富含碱性氨基酸残基，如Lys、Arg，此外还常含有Pro。
2. NLS的氨基酸残基片段可以是一段连续的序列，也可以分成两段，两段之间间隔约10个氨基酸残基（核质蛋白）。
3. NLS序列可存在于亲核蛋白的不同部位，在指导完成核输入后并不被切除。
4. NLS只是亲核蛋白入核的一个必要条件而非充分条件。

• 核定位信号的结构：单信号和二重信号 </aside>

<aside> 🍅 （亲）核蛋白入核转运的步骤

1. 结合：需NLS识别并结合输入蛋白（importin）；
2. 转运：需GTP水解提供能量。

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具体过程

1. 输入蛋白α（结合NLS蛋白）、β亚基（与核孔复合体的胞质丝相互作用）和货物蛋白相互作用形成一个运输复合体

2. 转运复合体通过改变构象的核孔复合体的中央栓相互作用，被转运到细胞核内，消耗ATP。

3. 在细胞核内，Ran-GTP蛋白与β亚基结合，使得复合物解体。 NLS蛋白留在核内，而Ran-GTP-β亚基复合物、α亚基重新回到细胞质。

4. 在Ran-GAP的协同作用下，GTP水解，Ran-GDP蛋白和B亚基分离，游离的输入蛋白β亚基和a亚基一起参与新的具有NLS信号的入核蛋白的运输。

   Ran-GTP必须和Ran-GAP相互作用，才能激活Ran-GTP的GTP酶活性，将其水解并释放Pi，成为Ran-GDP。

5. Ran-GDP可通过NPC回到细胞核中，在Ran核苷交换因子1 (Ran nucleotide- exchange factor 1, RCC1) 的作用下，释放GDP，重新结合GTP。

   RCC1是Ran的鸟苷交换因子（GEF）

• 爪蟾卵母细胞核质蛋白注射实验

• 第一个被确定的NLS序列的蛋白质——SV40病毒大T抗原

• [ ] 输入蛋白与输出蛋白

  仅有核定位信号的蛋白质自身不能通过核孔复合物，它必须与水溶性的NLS受体结合，才可穿过核孔复合体，这种受体称为输入蛋白(importin)。 输入蛋白分布在胞质溶胶，它们作为一种穿梭受体 (shuling receptor)在细胞质中识别并与核蛋白的核定位信号结合，然后一起穿过核，在核内与核蛋白分离后再返回到细胞质中。

  输出蛋白(exportin) 存在于细胞核中、能够识别输出信号并与之结合的蛋白质，帮助核内物质通过核孔复合体输出到细胞质，然后快速通过核孔回到细胞核中。