从细胞结构上看,HEK 293细胞是亚三倍体,仅含有人类单倍体配子染色体数的1/3

慢病毒包装生产及滴度测定,细胞转染,条件培养基制作,蛋白表达验证等试验。

1) 转染效率高;

2) 可悬浮培养用于大规模表达;

3) 表达蛋白结构最接近其在人体内构象;

4) HEK293细胞在培养体系中能够快速增长,高密度培养。

5) HEK293细胞与神经元细胞一样,对外界微环境较为敏感,利用这一特点,可用于药物发现及细胞毒性测试。

基本操作

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**来源:**人体肾脏

**形态:**上皮细胞

**生长特性:**贴壁

**注释:**该细胞含腺病毒5 DNA 。

细胞转染

慢病毒包装

慢病毒一般为HIV等为基础改造的接近无毒,感染后不进行复制的稳转株构建运载体。可以将目的基因携带并整合到细胞的基因组中,持续表达(普通转染一般指表达数天,随着分裂质粒会渐渐被稀释掉),进行长期试验。

慢病毒包装的过程和转染相似,主要区别在于慢病毒包装一般为多质粒混合转染(不同质粒含有病毒的不同元件),多个质粒的总质量和PEI的质量以及转染过程都与普通转染无异。

不同的是一般在转染后48h后,也就是换液后的30小时,收集细胞上清作为病毒的粗制品,来感染目的细胞。

CRISPR/Cas9基因敲除

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