<aside> 💡 GST-pulldown

主要用于研究**体外强烈或者稳定的蛋白质间相互作用，**可以验证两种已知的蛋白质可能存在的直接相互作用或者寻找可能与目标蛋白存在相互作用关系的未知靶蛋白，且体外验证蛋白直接相互作用时有较强的特异性。

基本原理：将靶蛋白-GST 融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽琼脂糖磁珠上，作为与目的蛋白亲和的支撑物，充当一种“诱饵蛋白”，目的蛋白溶与之孵育，从而捕获与之相互作用的“捕获蛋白”(目的蛋白)，洗脱结合物通过SDS-PAGE 电泳分离，最后经western blot 或质谱分析，从而证实两种蛋白间的相互作用。

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补充：co-IP 和GST pull-down区别

①co-IP：研究的是体内自然状态下的蛋白质互相作用，反应的是比较真实的蛋白质相互作用，由于沉淀下来的是蛋白质复合物，不能显示蛋白质之间的相互作用是直接还是间接的。

②GST pull down：可以确定目的蛋白和检测蛋白是否发生直接相互作用，但是无法得知体内真实的结合情况。