• [ ] 天然DNA来源： 染色体DNA/基因组DNA 、② 病毒、噬菌体DNA 、 质粒DNA 、④ 线粒体、叶绿体DNA
• [ ] 提取的DNA可用于：PCR扩增；Southern杂交；DNA文库构建；DNA测序；DNA分子标记及转基因克隆重组等研究

DNA的提取

<aside> 🚫 质粒DNA的分离和纯化

• 方法众多，主要依据： 分子大小不同、碱基组成不同 、超螺旋共价闭合环状结构不同
• 常用方法：
  • 碱变性抽提法
  • 煮沸法
  • 氯化铯密度梯度离心法
  • 羧基磷灰石柱层析法
  • [ ] 质粒DNA释放法 </aside>

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基因组/ 其他DNA的提取

组织和细胞破碎【液氮研磨法、玻璃珠法、超声波法、酶法】 →细胞裂解【蛋白酶K/SDS、CTAB】→去除蛋白【苯酚/氯仿/异戊醇（25:24:1）】→DNA沉淀【乙醇、异丙醇（絮状沉淀）】→DNA溶解【水，TE】→鉴定与保持【琼脂糖凝胶电泳；4/-20°C保存】

• SDS：十二烷基磺酸钠，阴离子去垢剂
• CTAB：十六烷基三乙基溴化铵，阳离子去污剂；能溶解细胞膜，也能与DNA形成复合物
• 苯酚/氯仿/异戊醇（25:24:1）
• PVP：聚乙烯吡咯烷酮，能与多酚结合形成复合物，有效去除多酚，减少多酚对DNA的污染；PVP与多糖结合，有效去除多糖。
• 巯基乙醇：打断多酚氧化酶中的二硫键，使多酚不易被氧化，随后经抽提去除

• 细菌
• 哺乳动物细胞
• 植物组织 </aside>

DNA的检测

• **琼脂糖凝胶电泳法：**DNA分子量的估计
• **紫外光谱分析：**DNA的定量和纯度测定