<aside> 💡 免疫沉淀（Immunoprecipitation, IP）

免疫沉淀IP 是利用抗体特异性反应富集纯化目的蛋白的一种方法，可用于目的蛋白的定性和定量分析。是用于抗原检测和纯化的最广泛使用的方法之一。

免疫沉淀（IP）的原理为：IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“protein A/G”特异性的结合到抗体（免疫球蛋白）的Fc片段的现象开发出来的方法。

实验步骤：针对特定靶蛋白的抗体与样品（细胞裂解物等）中的靶蛋白形成免疫复合物，随后利用Protein A-磁珠或Protein G-磁珠将该免疫复合物从混合物中沉淀下来。

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<aside> 🍁 免疫共沉淀：将抗体固定在一个固定支持物介质上，使用抗体来沉淀蛋白（抗原）的办法 —— 研究**体内(in vivo) 蛋白质相互作用**的经典方法，用于确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用

优点

相互作用的蛋白质都是经过翻译后修饰的，处于一种天然的状态

蛋白的相互作用在自然状态下进行，可避免人为的影响

可分离得到天然状态的相互作用蛋白质复合物

缺点

可能检测不到低亲和力尤其是瞬间的蛋白质-蛋白质相互作用

无法判定：蛋白1 与 蛋白2 之间是否存在蛋白3

免疫共沉淀的应用领域

较为广泛：寻找新的相互作用的蛋白质；检测两个已知蛋白间的相互作用

低丰度蛋白的富集和浓缩，为SDS-PAGE以及后续的质谱分析鉴定准备样本

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Co-IP的原理是基于IP反应捕获和纯化靶蛋白，如果样品溶液中存在与靶蛋白相互作用的目的蛋白，也会被一同捕获及纯化得到，随后利用SDS-PAGE、Western Blot等手段对得到的目标蛋白进行分析

蛋白+配体→天然蛋白复合物