**CRISPR/dCas9-FoKI基因编辑技术：**全失活的 Cas9（dead Cas9，dCas9）

同样是为了解决 CRISPR/Cas9 技术的脱靶问题，Guilinger 等采用了基于 dCas9 的策略。理论上 dCas9/sgRNA 只能起到单纯的靶向引导作用，无法诱导 DNA 的断裂，类似于 ZFN 或者 TALEN 中的 DNA 结合结构域。

为了实现 DNA 的切割，其引入的 FoKI 核酸内切酶的切割结构域，与 dCas9 连接做成融合蛋白 fCas9，这与 ZFN 及 TALEN 的设计策略如出一辙。在人类细胞的基因编辑中，fCas9 的特异性比野生型 Cas9 要高出 140 倍以上。而在高度类似的脱靶位点上，fCas9 的特异性要比 Cas9n 至少高出 4 倍。fCas9 的应用将进一步丰富 Cas9 工具箱，提供更完善的基因编辑工具。