https://pic1.zhimg.com/80/v2-58d197ec184b3a3365c18ae35245b060_720w.jpg

Anydeplete技术首先通过随机引物进行一链合成,一链合成引入核苷酸类似物,用于酶切打断,二链合成同样引入核苷酸类似物用于保证链特异性

然后两端加上接头,接头一条链也带有核苷酸类似物,用于酶切降解。当形成单链文库后,设计特异性引物与rRNA形成文库结合,一轮退火延伸,rRNA文库形成双链结构。Reverse adaptor上带有特异的酶切位点,当形成双链结构酶切位点被识别,切去接头,这样rRNA形成的文库不带有完整的接头,而其他文库带有完整接头,通过PCR扩增富积既能得到想要的信息,包含mRNA及LncRNA信息。同样Anydeplete技术与10×genomics技术一样,包含分子标签,可分析duplication及PCR产生突变位点。Anydeplete技术能够用于降解性样本,保证5’端及3’端信息的完整,能同时得到mRNA及LncRNA信息,如果只希望得到mRNA信息,Anydeplete技术则会引起一部分数据浪费。