蛋白质芯片的产生
基因芯片:可较好反映出mRNA表达状态;mRNA的表达量常**不能反映相应的蛋白表达水平
**
<aside> 🍁 蛋白质组
广义:细胞内所表达的全部蛋白质 狭义:基因组所表达的全部蛋白质,包括蛋白质的结构及网络变化规律
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[ ] 涉及领域
转基因研究,生物医学,农作物鉴定,新药物研发,肿瘤预测
<aside> 🍁 蛋白质组学
定义:蛋白质组概念的延伸,**在整体水平上研究细胞内蛋白质组成及其活动规律
**的一个学科
特质:研究对象着眼于全面性和整体研究生命体系内所有蛋白质的性质和功能;采用高通量和大规模的研究手段,在回答有关生命活动机制的基本问题方面达到了空前的规模和速度 </aside>
[ ] 芯片:支持物的介质表面
(玻片,NC膜……);用**荧光染料标记的探针分子
加在点有蛋白样品的膜或者是玻片上,通过激光扫描仪
,可以看到探针与之结合蛋白质的一些荧光信号
**,通过分析可知它们之间表达的差异
<aside> 🍁 蛋白质芯片
大量蛋白质分子按预先的设置
进行微阵列排布
,固定于载体制成芯片,根据蛋白质分子间、抗原、抗体、受体、配体等特异性结合的原理,检测蛋白质表达差异
**。蛋白质相互作用的关系;DNA-蛋白质;RNA-蛋白质;药物蛋白靶标
分析蛋白芯片Analytical microarrays【捕获芯片 (capture arrays)】
芯片上点有 抗体库、配体库
—— 捕获蛋白质 —— 与裂解后的细胞杂交——观测蛋白或转录因子的表达—— 对病变组织的鉴定与分析
功能性蛋白芯片 Functional protein microarrays
将蛋白质固定于芯片上,研究蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA、 蛋白质-小分子相互作用,如酶的催化活性。
蛋白:**全长或功能结构域
一>适合从蛋白组学层面
**研究其生化活动
反相蛋白芯片 Reverse phase protein microarray
一 种蛋白微量分析技术
激光捕获:细胞或不同来源的细胞 (如疾病组织;体液如血清、脑脊液、尿液等)
样本固定于芯片
—— 目标蛋白抗体为探针;比色或荧光方法来检测;已知量的肽段作参考 —— 检测由于疾病导致的蛋白表达量的改变 【特别是:翻译后修饰 (post-translational modifications)】
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