定量细胞化学分析与细胞分选技术

流式细胞仪(flow cytometer), 也称荧光激活细胞分选仪(fluorescence activated cell sorter, FACS)是从多细胞悬液中分离目的细胞的精密仪器。

流式细胞仪一般由液流系统、激光发器件、信号检测和控制系统四部分组成。

通常用氢离子激光发出的激光束为激发光,通过调节液压,迫使悬浮细胞排成单列,按重力方向流动,当细胞通过激光束检测区时,细胞被激光束照射而向各个方向发出散射光,若经荧光染色的细胞,就会发出一定强度的荧光

仪器的检测系统可逐个对细胞的散射光和荧光强度进行测定,并将测得的光信号转变成电信号,由电子控制台放大和显示。

因此,流式细胞仪具有更广泛的用途。在用于细胞分离上,其特点是用带有荧光的特异抗体标记待分离的细胞,然后在流式细胞仪中从未标记的细胞中分选出标记细胞。当一个有荧光抗体标记的细胞液滴通过激光检测器时,将被带上负电,不含荧光标记的细胞被带上正电,这些带电细胞液滴通过电场时将偏离原来流动的方向,分别收集带正、负电荷的细胞即可得到想要分离的细胞。流式细胞仪可以每秒2万个的速度对细胞进行分选,其纯度可超过95%。

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