基因编辑的大致过程是：

(1) 将宿主菌株制备成感受态细胞，宿主菌株的基因组上提前整合了λ-Red重组系统，在制备感受态细胞的过程中诱导重组酶表达；

(2) 将质粒pCas9cur、质粒psgRNA和线性Donor DNA共转入宿主细胞中，或者将质粒psgRNA和线性Donor DNA共转入含有质粒pCas9cur的宿主细胞中；

(3) 线性Donor DNA在重组酶的介导下与基因组目标序列发生重组，同时组成型表达的Cas9和sgRNA形成复合体识别并切割尚未重组的基因组序列；

(4) 基因编辑成功后诱导质粒pCas9cur上的sgRNA表达，这个sgRNA针对质粒psgRNA上的Amp抗性基因，因此可以除去质粒psgRNA，从而进行下一轮编辑。