咖啡因——>使PDE失活，cAMP降解被抑制

3‘，5’-磷酸二酯键

细胞周期概述

ATCC: American Type Culture Collection

Restriction point，限制点：R点

合成DNA和分裂的能力分成三类：

• 连续分裂细胞
• 休眠Go细胞（干细胞，肝细胞）
• 终末分化细胞

分期

**G1：**组蛋白(碱性)合成，

• 酶

—（P53：分子警察）—>

S（DNA合，组蛋白的合成与DNA的合成紧密偶联在一起成）

G2

M（活动最弱，染色体凝缩与分离）

中期——染色体最易观察

图谱特征：

流式细胞仪：PI染色- - 检测细胞周期—— 细胞数目 - DNA含量

生化活动、速率、动力学

驱动和监控机制：

A. 细胞周期驱动增殖调控点——restriction point

酵母细胞——start，启动因素为营养素，细胞体积

人类细胞——restriction point, 多为生长因子

B. 细胞周期监控——检查点

细胞周期的完成不仅是一分为二，还需保持质量上的忠实复制

检查点:

1. G1-S, S期DNA复制前对DNA损伤的检测
2. S-G2-M各期, 对时相次序的检测

细胞周期的调控机制

1. 细胞周期的正性调控

   周期素（cyclin ），又称为周期蛋白

   周期素依赖性蛋白激酶 (cyclin-dependent-kinase, CDK )

2. 细胞周期的负性调控

   CDK的抑制剂（ cyclin-dependent-kinase inhibitor, CKI ; CDK inhibitory protein, CIP）

1. 细胞周期的正性调控

Cyclin–CDK复合物才具酶活性

CYC：调节亚基 (cyclin)

• 人类细胞主要有：cyclin A、B、 D、E

• CYC：调节亚基——表达起伏（生长因子 调控）

  

CDK：催化亚基

人类细胞CDK主要有CDK1-8

CDK在细胞周期被cyclin时相性激活。

G1→S跨越的关键：pRb的磷酸化

细胞在生长因子的作用下，G1期cyclin D表达，并与CDK4、CDK6结合，使下游的pRb磷酸化，磷酸化的pRb释放出转录因子E2F，促使许多基因的转录，如编码cyclinE、A和MCM（复制解旋酶）的基因

cyclin D-CDK4/6：pRb起始磷酸化

cyclin E-CDK2：pRb高度磷酸化

2. 细胞周期的负性调控 —— CKI：CDK inhibitor

P53：检测DNA，DNA突变—>上调P21

P21：使细胞停滞在G1期

INK4 (inhibitors of kinase 4)家族：

p15, p16, p18, p19, 与cyclin竞争结合CDK4 和CDK6，抑制CDK的正性调节作用，延缓或抑制细胞增生

CIP/KIP家族：

p21, p27, p57, N端有CDK抑制功能域，与不同的CDK结合并抑制其活性，主要抑制CDK2的激酶活性，延缓或抑制细胞增生

CDK的磷酸化调控

磷酸化位点不同，效果不同————调控的多样性

• CAK：CDK-activating kinase，CDK激活激酶
• Cyclin H-CDK7；整个细胞周期中CAK保持活化状态

促进 ——>

抑制 ——I

CYC表达受生长因子调控，CDK一直存在，两者结合后具有生物活性，复合物受p21调控

细胞周期机制破坏与肿瘤发生

1．细胞周期驱动机制失控

■ Cyclins的过表达

肿瘤的发生与cyclin（D、E）过量表达有关（原癌基因激活）

• 基因扩增（Cyclin D1过表达的主要机制）
• 染色体倒位（Chromosome inversion）
• 染色体易位（Chromosome translocation)
• 基因突变

■ CDK 表达异常

■ CKI表达不足和突变

2. 细胞周期监控机制受损