酶的提取和分离纯化——是指将酶从细胞或培养基中取出，再与杂质分开，而获得与使用目的要求相适应的有一定纯度的酶产品的过程，是酶工程的主要内容之一。

一、最主要的考虑：应用【量、纯度】

二、 酶的提取、分离纯化技术路线

细胞破碎- - -酶提取- - -酶分离纯化【离心分离，过滤分离，沉淀分离，层析分离，电泳分离，萃取分离，结晶分离等】- - -酶浓缩- - -酶贮存

三、遵循的原则

1、原料易得，成本低，含酶量高

2、各过程条件温和

3、尽可能使用缓冲液

4、操作中，注意保护酶活力，如加EDTA、半胱氨酸、蛋白酶抑制剂等

5、跟踪酶分离每一步的总活力和比活力，判别每步方法的可行性

• 纯化倍数=提纯后比活力/提纯前比活力【表示方法的有效程度】
• 回收率＝提纯后酶总活力/提纯前酶总活力×100％【反映酶的损失情况】
• 总活力＝酶活力单位数X 酶液总体积，即样品中全部酶活力

6、注意分离方法的使用顺序 （1）先用低分辨率的方法- - -离心、沉淀、过滤等 （2）后用高分辨率方法- - -结晶、膜分离、离子层析 （3）昂贵、分离规模小的放最后- -凝胶层析、亲和层析、HPLC(高压液相色谱）等