微生物工业对菌种的要求

• 能在廉价原料制备的培养基上迅速生长，并能生成高产量的代谢产物；
• 条件易于控制；
• 生长迅速，发酵周期短；
• 满足代谢控制的要求；
• 抗噬菌体能力强；
• 菌种不易变异退化；
• 安全性（不是病源菌，不产毒素）。

发酵工业常用微生物

• [ ] 从菌种的遗传学特征上可以把菌种分为：

  野生型、培养：营养缺陷型……

• [ ] 从微生物分类学的角度，分为

  • 细菌类
  • 酵母菌
  • 霉菌
  • 放线菌：各种抗生素，链、土、庆大等

一、种子制备过程

• 种子的准则

• [ ] 种子制备的过程：实验室种子制备阶段、生产车间种子制备阶段

  

  <aside> 🎯 实验室种子的制备

  实验室种子制备阶段：琼脂斜面至固体培养基扩大培养（如茄子瓶斜面培养等）或液体摇瓶培养【一般，在砂土管或冷冻干燥管内保藏的菌种以无菌的方式接至适合的斜面培养基上，培养成熟后，挑选正常的菌落再接一次试管斜面】

  

  • 实验室种子制备方式
    • 固体培养基培养——对于产孢子能力强的及孢子发芽、生长繁殖快的菌种【孢子可直接作为种子罐的种子，这样操作简便，不易污染杂菌】
      • 优缺点
      • 固态培养法
    • 液体培养法——对于产孢子能力不强或孢子发芽慢的菌种

      • 优缺点

      • 表面培养法

        对于不产孢子的细菌，如谷氨酸棒杆菌等。可利用茄子瓶，克氏瓶等

      • 液体种子制备

        • 好氧培养
        • 厌氧培养：用于兼性厌氧菌和专性厌氧菌
  • 孢子制备
    • 细菌孢子的制备
    • 霉菌孢子的制备
    • 放线菌孢子的制备 </aside>

  <aside> 🎯 生产车间种子制备

  生产车间种子制备阶段：种子罐扩大培养

  

  • 种子罐的培养基
  • 种子罐培养目的
    • 获得足够的数量菌种：使孢子发芽，生长繁殖成菌丝，接入发酵罐能迅速生长，达到一定的菌体量，以利于产物的合成
    • 种子罐的培养基更接近发酵罐培养的醪液成分和培养条件，以使菌体适应发酵环境
  • 种子罐级数
  • 种龄
  • 接种量 </aside>

二、影响种子质量的因素

• 原料质量和培养基
• 培养条件
  • （1）温度
  • （2）湿度
  • （3）pH
  • （4）通气量与搅拌(氧的供给 )
• 斜面冷藏时间
  • 斜面冷藏对孢子质量的影响与孢子成熟程度有关
  • 冷藏时间对孢子的生产能力也有影响
• 染菌

三、种子质量的控制措施

• 种子质量的判断- - - 测定一些参数以观察基质的代谢变化及菌丝形态是否正常
• 种子质量的最终指标是考察其在发酵罐中所表现出来的生产能力
• 一级种子罐染菌原因及解决方法

四、无菌接种

• 菌种与斜面培养

• [ ] 接种：为了获得用于生产的充足的菌体——注意防止杂菌污染

  无菌操作接种技术：斜面接种、液体菌种向固体培养基接种、固体菌种向固体培养基接种、浅盘固体培养基接种