多肽链的氨基酸序列测定

推定的依据是“中心法则”

蛋白质测序

末端残基分析

Edman

几种蛋白酶的专一性

二硫键的断裂

氨基酸组成的分析

主要是酸水解，同时辅以碱水解

• 酶水解：不彻底
• 水解产物用层析法鉴定氨基酸的组成和含量

多肽链的部分裂解

# 要求：裂解点少，选择性强

酶裂解：

不会破坏氨基酸，不会发生消旋化，产物为较小的肽段

化学裂解：

CNBr溴化氰断裂Met残基的羧基参加形成的肽键- - -形成较长的肽链片段（便于排序）

质谱法

质谱法

肽段在原多肽链中次序的确定（氨基酸全序列的重建）

不同方法得到不同片段- - 重叠法

二硫桥位置的确定

二硫键断裂后：分子量减小，负电荷增加→往正极移动更快