[ ] 融合基因(fusion gene)：是指应用DNA体外重组技术，构建的一类含两个或两个以上的不同基因序列的杂合基因。
[ ] 融合蛋白：是指通过将两个或多个基因的开放阅读框按一定顺序连接在一起并通过表达而形成的杂合蛋白。
融合蛋白之间若有酶切位点：可以分开
原则上讲，所有融合蛋白在构建的时候，都可以添加linker连接肽
[ ] 开放阅读框 (open reading frame，ORF)：起始于AUG、止于UAA、UGA、UAG的连续的密码子区域，是潜在的编码区。
基因融合的策略
<aside> ⛈️ 定位信号
N端信号
C端信号
**连接子（linker）**用于连接由单个启动子驱动的多个ORF同时表达。连接子有两种类型：
| IRES “同时转录，独立翻译” | 2A “同时转录，同时翻译” | |
|---|---|---|
| 优点 | 不影响上下游ORF的蛋白序列 | *下游与上游ORF相当（或者略小于） |
| *结构小，缓解了某些载体装载量的压力，也为联合应用多种工具构建三个以上顺反子提供了可能 | ||
| 缺点 | *与上游ORF相比，下游ORF的表达水平比较低（通常为上游的10%-20%） | |
| *IRES元件的大小（>500 bp）也可能会增加载体构建和病毒包装的难度 | ||
| *可能是会在上下游ORF留下附加残基 | ||
| *2A肽的自我切割并不是100％有效的，其效率会受上下游ORF序列的影响 |
一、纯化标签
二、报告标签
<aside> ⭕ 报告基因
报告基因：指一类在细胞、组织/器官或个体处于特定情况下会表达并使得他们产生易于检测、且实验材料原本不会产生的性状的基因。
必须具有以下几个条件：
- 已被克隆和全序列已测定；
- 表达产物在受体细胞中本不存在，即无背景，在被转染的细胞中无相似的内源性表达产物；
- 其表达产物能进行定量测定。
常见报告基因大类
- 抗生素抗性蛋白
- 氯霉素乙酰基转移酶（CAT）
- β半乳糖苷酶
- 荧光素酶
- 分泌型碱性磷酸酶（SEAP）
- 荧光蛋白家族 </aside>