思考与简答题

1. 荧光显微镜成像原理是什么？荧光显微镜与普通复式光学显微镜相比，主要有哪些关键部件上的差别？

**答：**荧光显微镜成像原理是根据荧光素分子受到激发后产生一定的波长的可见光，即荧光；荧光显微镜与普通复式光学显微镜相比，主要体现在前者光源不同，还有激发滤片以及双分镜等。

2. 不同荧光素所需激发光的波长往往不一样，荧光素受激发后产生不同的荧光。细胞经过不同荧光素标记后，怎样才能够获得不同荧光的图片？（如教材图3-7）

**答：**不同荧光素受不同激发光激发，产生不同荧光后将图片重叠（merge）在一起即可。

3. 为了定位某种特异蛋白在细胞中的含量或者分布，可以采取什么方法？如果要定位某种蛋白在细胞中的精细定位，又应该采取何种方法？

答：定位某种特异蛋白在细胞中的含量或者分布，可以用免疫荧光显微镜的方法；如果要实现精细定位，则需用免疫电竞技术。

4. 根据流式细胞仪的工作原理，试分析随着PUMA表达后的时间延长，DNA发生了什么变化？

图 流式细胞仪分析 PUMA 在 SAOS-2 细胞中表达 6、12、24h 后 DNA 变化

**答：**流式细胞仪分析结果显示细胞呈亚二倍体，表明出现了 DNA 被切割的现象，细胞出现凋亡。

1. 酵母双杂交技术和荧光共振能量转移技术都能够用于分析蛋白质分子间是否相互作用，二者有何不同？

**答：**二者原理不同；酵母双杂交技术往往可以批量发现蛋白质相互作用。