二代测序：二代测序技术基于大规模平行测序技术（massive parallel analysis，MPS），它能同时完成测序模板互补链的合成和序列数据的获取。主要可以分成Roche 454焦磷酸测序、Illumina Solexa合成测序和ABI SOLiD连接法测序。

• 特点
• DNA芯片杂交测序（sequencing by hybridization）技术：继荧光毛细管电泳技术后发展起来的一新种技术

<aside> 💠 二代测序

• Roche 454焦磷酸测序
• Illumina Solexa合成测序
• ABI SOLiD连接法测序

• 2.5代测序：半导体测序技术 </aside>

<aside> 🍅 二代测序DNA建库

针对于illumina测序平台，DNA类的文库主要分为：DNA小片段文库、DNA大片段文库、Exon文库、PCR-Free文库和单细胞文库等。

• [ ] 测序片段示意图

  

• adaptor：接头，为一段已知的短核苷酸序列，用于链接未知的目标测序片段

• index或barcode：几个碱基组成的寡核苷酸链，用于在混合测序时，区分不同样本

• insert：待测序的目标序列，位于两个adapter之间

• 测序片段：universal_adapter-insert-indexed_adapter

• DNA小片段建库
• DNA大片段建库
• Exon文库
• PCR-Free文库
• 单细胞DNA文库 </aside>

Protocol: DNA+RNA → RNA → mRNA → cDNA → adaptor → PCR → sequence