慢病毒可快速、高效的将目的基因整合到宿主细胞基因组,非常适合用于构建稳转细胞株。但慢病毒也有缺点,即使是稳转细胞株,可能会随着传代次数的增加而慢慢丢失干扰或者过表达的效率。其中可能是原因是在多克隆稳转细胞系的培养过程中,经慢病毒整合的细胞可能相对于野生型在生长活力没有优势,因此随着传代次数的增加,经整合的阳性细胞数目慢慢变少,从而导致效率降低。在这种情况下可以选择挑选单克隆稳转株的方式。

简介

慢病毒(lentivirus)属于逆转录病毒科下的慢病毒属,由于慢病毒感染宿主后,在经历较长的潜伏期后缓慢发病,因此被称为慢病毒;在几个典型物种中都是免疫缺陷病毒

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HIV病毒

目前在分子克隆领域中我们主要接触的慢病毒载体系统就是从人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency viruses,HIV)改造而来的。HIV病毒分为1型和2型,其中1型是造成人类AIDs的主要原因(HIV病毒仍然有非常详细的亚分类)

慢病毒载体系统

<aside> 🎯 慢病毒载体系统——构造

慢病毒包装

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高滴度的慢病毒包装依赖于高效率的质粒转染适合的生产宿主。因此为了包装出滴度更高的慢病毒: