基因组测序策略—— 主要有两种

• 自下而上（Bottom-up approach／ mapping）或由短到长作图策略
• 自上而下（top-down mapping）或由长到短作图策略

基因组测序方法与组装

<aside> ⭕ 第一代测序——20世纪80年代DNA测序技术主要有：

<aside> 🔳 Sanger等（1977）发明的双脱氧链末端终止法

• 原理
• 荧光毛细管电泳技术：第一代基因组测序的主要技术之一
• 鸟枪法测序 </aside>

<aside> 🔳 Maxam和 Gilbert（1977）发明的化学降解法

• 原理
• 共性
• 被取代原因 </aside>

</aside>

<aside> ⭕

第二代DNA测序技术（second-generation DNA sequencing）

基于大规模平行测序技术（massive parallel analysis，MPS），它能同时完成测序模板互补链的合成和序列数据的获取。也称为新一代DNA测序技术（next generation DNA sequencing）。

主要包括：

• Roche (454) GS FLX sequencer
• Illumina Solexa（ Illumina genome analyzer ）
• ABI SOLiD（ SOLiD sequencer ）

</aside>

<aside> ⭕ 第三代DNA测序技术

三代测序技术是指单分子测序技术，在测序时，不需要经过PCR扩增，实现了对每一条DNA分子的单独测序，也叫单分子实时DNA测序。主要可以分为单分子荧光测序和纳米孔测序。

平台

• Ｈelicos Ｂiosciences——Heliscope
• Pacific Biosciences（Single Molecule Real-time Technology）——SMRT
• Oxford Nanopore Technologies

等多种测序仪器组成的基因组分析实验技术平台

</aside>

应用

• 基因组de novo 测序
• 基因组重测序 重测序（Re-sequencing）是
• 简化基因组测序
• 转录组测序