人类、动物、植物的全基因组序列分析往往需要克隆数百甚至上千kb 的DNA片段,此时考斯质粒的装载量也远远不能满足需要。

细菌接合因子酵母菌染色体上的复制区、分配区、稳定区与质粒组装在一起,即可构成染色体载体。当大片段的外源DNA克隆在这些染色体载体上后,便形成重组人造染色体【基于ARS、CEN、TEL是线性染色体稳定的功能序列,人们利用这些序列构建载体,重组后的DNA以线性状态存在,这样不仅稳定,而且大大提高了插入外源基因的能力,并且可以像天然染色体一样在寄主细胞中稳定复制和遗传,故称为人工染色体】,它能像天然染色体那样,在受体细胞中稳定的复制并遗传。


类型:

细菌人造染色体( Bacterial Artificial Chromosomes,BAC)

细菌人造染色体通常是在大肠杆菌性因子F质粒的基础上构建的,命名为pBACs,其装载量范围在50-300 kb之间。各种类型的pBACs在大肠杆菌受体菌中只能维持单一拷贝

pBACs主要适用于:克隆大型基因簇(gene cluster)结构、构建动植物基因文库

噬菌体人造染色体(PAC)

人类人造染色体(HAC)

酵母人工染色体(Yeast Artificial Chromosomes, YAC)

YAC:TEL(端粒序列)、CEN(着丝粒序列)、ORI(自主复制序列)、选择标记

够承载较大的外源基因,并且保持线性人工染色体的稳定复制和遗传。

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