一代测序：一代测序主要可以分成双脱氧链终止法（又称Sanger法）和化学降解法。

• 特点：第一代测序技术的准确性远高于二、三代测序，因此被称为测序行业的“金标准”。
• 优势
• 劣势
• 应用

（1）双脱氧链终止法

• 桑格（Sanger）和考尔森（Coulson）采用DNA复制原理。Sanger测序反应体系中包括目标DNA片段、脱氧三磷酸核苷酸（dNTP）、双脱氧三磷酸核苷酸（ddNTP）、测序引物及DNA聚合酶等。
• 每一次序列测定由一套四个单独的反应构成，每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)，在4个DNA合成反应体系中分别加入一定比例带有放射性同位素标记的ddNTP（分为：ddATP,ddCTP,ddGTP和ddTTP），通过凝胶电泳和放射自显影后可以根据电泳带的位置确定待测分子的DNA序列。

ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基团，不具有与另一个dNTP连接形成磷酸二酯键的能力，这些ddNTP可用来中止DNA链的延伸，使延长的寡聚核苷酸选择性地在G、A、T或C处终止；此外，这些ddNTP上连接有放射性同位素或荧光标记基团。终止点由反应中相应的双脱氧而定。每一种dNTPs和ddNTPs的相对浓度可以调整，使反应得到一组长几百至几千碱基的链终止产物。它们具有共同的起始点，但终止在不同的的核苷酸上，可通过高分辨率变性凝胶电泳分离大小不同的片段，凝胶处理后可用X-光胶片放射自显影或非同位素标记进行检测。

（2）化学降解法

马克西姆（Maxam）和吉尔伯特（Gilbert）

Maxam-Gilbert 化学降解法

原理为：

• 将DNA片段的5‘端磷酸基使用放射性标记
• 再分别采用不同的化学方法修饰和裂解特定碱基，从而产生一系列长度不一而5'端被标记的DNA片段
• 这些以特定碱基结尾的片段群通过凝胶电泳分离
• 再经放射线自显影，确定各片段末端碱基，从而得出目的DNA的碱基序列。

值得注意的是，就在测序技术起步发展的这一时期中，除了Sanger法之外还出现了一些其他的测序技术，如焦磷酸测序法、链接酶法等。其中，焦磷酸测序法是后来Roche公司454技术所使用的测序方法，而连接酶测序法是后来ABI公司SOLID技术使用的测序方法，但他们的共同核心手段都是利用了Sanger1中的可中断DNA合成反应的dNTP。